蒙娜麗莎有2幅。蒙娜麗莎不過是一個商人的妻子，在那個年代商人再有錢也是上不了臺面的不入流小人物，畢竟佛羅倫薩一堆有錢有權的貴族上流人物都紛紛排著隊等著達芬奇他老人家畫肖像，而達芬奇居然毫不留情地通通拒絕了這些貴族邀約，轉而用長達十六年來畫一位名不見經傳的商人妻子的畫像，達芬奇一向是提倡科學昌明的，這在邏輯上似乎說不過去，他做事情不會無緣無故，那么到底是什么原因讓達芬奇決定去畫蒙娜麗莎。

1500年，達芬奇回到闊別多年的佛羅倫薩，為權貴人世設計軍事工程，故此拒絕了眾多貴族要求畫肖像的請求，他說太忙了沒工夫把時間浪費在畫肖像上。可根據文藝復興大作家瓦薩里（GiorgioVasari，1511–1574）《藝苑名人傳》的記載，達芬奇卻有時間來為佛羅倫薩富商弗朗西斯科·戴爾·焦孔多（FrancescodelGiocondo）的妻子麗莎畫肖像。

據瓦薩里記載，達芬奇這幅肖像惟妙惟肖，恍如血肉之軀，根本不像人類可以畫出來的，生動至極，而據說達芬奇為了不讓畫作里的麗莎夫人看起來太憂郁，特意掏腰包請來樂手彈奏樂曲暖場子，動聽的音樂讓麗莎夫人聞之莞爾一笑，達芬奇見此景也終得大筆一揮，記錄下來了那個世界上最為神秘的微笑。

正如瓦薩里所言，蒙娜麗莎的肌膚煥發出柔軟光芒，這些光芒變化讓人覺出了肉體的豐滿和柔潤，《蒙娜麗莎》這幅畫最讓人迷惑不解的是她的神秘微笑。不同的人在不同時間欣賞，都可以有不同感受，有專家認為蒙娜麗莎的笑容可理解為畫家對母親的傷感懷念，因為畫中人看起來有些悲傷，有人認為蒙娜麗莎的微笑是天真無邪的，也有人認為她的微笑非常誘媚，真相是達·芬奇當年繪制很多肖像畫多半帶有這樣的神秘微笑，可是你們知道達芬奇為了能夠繪制出這樣的微笑到底又多努力嗎？來看一看他的素描手稿就知道了。

為了能夠畫出不同程度的微笑，達芬奇真的很拼，在佛羅倫斯圣瑪麗亞紐瓦醫院解剖過三十多具尸體，仔細地研究過人體肌肉構造，蒙娜麗莎各個角度的微笑早已事先一一都被模擬出來了。